hat培养基:为什么可以利用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞

1.为什么可以利用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞

在HAT培养基中含有次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）。由于选用西黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型（HPRT-）骨髓瘤细胞或胸腺嘧啶核苷激酶缺陷（TK-）骨髓瘤细胞为亲本，该细胞只能通过全合成途径合成DNA。因为淋巴细胞具有合成DNA的两条途径。

2.HAT选择培养基的作用是筛选出什么

HAT选择培养基的作用是筛选出含有次黄嘌呤-鸟嘌呤核苷磷酸核糖基转移酶（HGPRT）或胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的细胞。HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的。缺失这两种酶的细胞，才能是细胞重新获得用旁路途径进行DNA合成能力。扩展资料HAT选择法即胸苷激酶基因选择法，胸苷激酶（Thymidine Kinase，简称TK）能催化胸苷（T）转变成dTMP，TK选择系统将含有tk+基因的表达载体导入tk-宿主细胞，再用含有次黄嘌呤（H），氨基喋呤（A）和胸苷（T）的培养基培养细胞，dGTP的合成，但H可合成IMP，再由IMP合成dATP和dGTP。

3.HAT培养基是什么培养基

这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合成旁路合成次黄嘌呤和胸苷.HPRT和TK缺陷细胞可以在此培养基中生存.是常用的骨髓杂交瘤细胞选择性培养基.

4.HAT培养基是什么培养基

在HAT培养液中，未融合的效应B 细胞核两个效应B细胞融合的D途径被氨基蝶呤阻断，随S途径正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型细胞。且D途径又被氨基蝶呤阻断，所有在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。只有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的S途径，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中家次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷酸。动物细胞中的DNA合成有两条途径：一条途径是生物合成途径（“即由氨基酸及其其他小分子化合物合成氨基酸。

5.HAT 的选择原理

在HAT培养液中，未融合的效应B 细胞核两个效应B细胞融合的D途径被氨基蝶呤阻断，随S途径正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10天左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型细胞。因此自身没有S途径，且D途径又被氨基蝶呤阻断，所有在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。只有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的S途径，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。扩展资料：HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中家次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷酸。动物细胞中的DNA合成有两条途径： 一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其其他小分子化合物合成氨基酸，为DNA分子的合成提供原料。再此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而HAT培养液中氨基蝶呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断DNA合成的D途径。 另一条途径是应急途径（“S途径”），利用次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核苷转移酶和胸腺嘧啶核苷激酶催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。参考资料来源：百度百科——hat培养基

6.HAT培养基是什么培养基

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，称为天然培养基；应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基，大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管，培养基由于配制的原料不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后。

7.什么是HAT培养基

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基，大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管。