mef细胞:MEF细胞中发现被293T细胞污染，如何去除293T?

1.MEF细胞中发现被293T细胞污染，如何去除293T?

293T细胞啊，细胞会有一两个突起。你看到的圆细胞是和周围的细胞形态明显不同的么?

2.生物学中的MEF是纤维细胞吗

MEF 全称 Mouse Embryonic Fibroblast 是典型的梭状成纤维细胞.实验室取MEF细胞一般是用13.5天的胚胎.MEF经过伽马射线处理或者丝裂霉素C处理之后的细胞,

3.mef细胞是什么

最靠谱

4.mef养小鼠干细胞的话只能是p5代以前吗

现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵。

5.胚胎干细胞实验mef可以不用小鼠细胞提取吗

您好，现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵，技术要求高，都会寻求外包。但是现在竞争也比较大，的得看单位这边整体做的怎么样。其次要看下你选择单位的规模如何，上海这边的，你可以看下基尔顿生物。

6.如何从mef上提取es细胞dna

胚胎干细胞的获得和培养、打靶载体的构建、重组ES细胞的筛选、嵌合体小鼠的制备、基因敲除小鼠的建立、Cre-loxP系统、FLP/FRT系统和条件性基因敲除、基因敲入和大规模ES细胞突变库的建立。是利用同源重组技术来定点改变物种的基因组顺序和结构，从而在突变的个体内来研究基因及基因组的功能。2. 基因敲除：某几个基因或基因的顺式元件产生缺陷，来推测这些基因或元件原来在体内的功能。在个体基因组中定点加入某个/某几个基因或顺式元件，从而研究该基因或顺式元件在体内的功能。4. 基因打靶技术是一种定向改变生物活体遗传信息的实验手段。它的产生和发展建立在胚胎干细胞技术和同源重组技术成就的基础之上，自1987年早期胚胎干细胞技术建立及第一例基因剔除小鼠诞生以来，基因打靶的研究进展迅速，成为后基因组时代研究基因功能最直接和最有效的方法之一。一、胚胎干细胞的获得和培养 基因打靶中用的小鼠ES细胞系有：均来源与129小鼠品系和其杂交品系。常用的饲养层细胞为PMEF（小鼠原代胚成纤维细胞）。建立ES细胞的过程中，最好采用只传了2-3代的原代小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养细胞，所取得的ICM（内细胞团）只有10％-30％的几率建立ES细胞系。一旦ES克隆被确定，接下来应该考虑检查ES细胞的核型。2、ES 细胞的核型分析 建立的ES细胞有相当的比例（30-50％）不具备正常核型，C带技术进行核型分析：小鼠细胞有40条染色体（19对加两条性染色体）。3、ES细胞的扩增 一旦ES细胞系中高比例的细胞被确定有正常二倍体染色体数目，每5－6天ES细胞需经胰蛋白酶消化，以有效的低密度接种到新鲜培养基中，以保持细胞的不分化状态。PMEF需6Gy的X射线照射或丝裂霉素C处理细胞抑制生长后才能用作饲养细胞。二、打靶载体的构建 打靶载体通常包括2个同源重组臂，用于指导打靶载体和染色体上的靶基因序列发生同源重组。同源重组臂上含有一个正筛选基因（neo），一个负选择标记的胸苷激酶（tk）基因。三、重组ES细胞的筛选 1. 饲养细胞的准备；5. 96孔板ES细胞备份与细胞冻存；四、嵌合体小鼠的制备 1. ES细胞的复苏。2. ES细胞的囊胚注射；每天留一些ES细胞备第二天注射：ES细胞注射到3.5天的小鼠囊胚；每只囊胚可注射10-20个ES细胞，注射的胚胎移入2.5天的假孕小鼠的子宫，五、基因敲除小鼠的建立 选择嵌合率高的雄性子鼠×野生型雌性小鼠。FRT系统和条件性基因敲除 Cre/Cre重组酶基因和loxP序列位于P1噬菌体基因组内，loxP是Cre酶的识别序列，Cre（FLP）重组酶有删除/。整合、倒位、转位等功能;引入loxP位点的ES细胞建立一个小鼠品系，最后建立基因敲入的小鼠品系。八、大规模ES细胞突变库的建立 在ES细胞中利用基因捕获方法建立随机突变的ES细胞库是目前广受瞩目的研究计划。基因捕获（gene trap）技术有很多形式，在建立ES细胞突变库中最常用有两种：将不带启动子的筛选基因（LacZ、neo）和完整的polyA信号序列组成打靶载体，在筛选基因前可放一个RNA剪接受体，将载体转染ES细胞，进行随机插入ES细胞染色体。如果筛选基因恰好插入内源基因启动子下游，并在ES细胞中表达，那么筛选基因就可被转录，因插入导致基因的失活，可以实现高通量的基因突变库，获得大量插入靶点明确的ES细胞克隆。利用一个缺失polyA信号的选择基因，同时在筛选基因下游放置RNA剪接的共体序列，利用该打靶载体转染ES细胞后。

7.简述原核生物蛋白质的合成过程

林少晓凡2蛋白质合成的过程蛋白质生物合成的具体步骤包括：②活化氨基酸的转运；③活化氨基酸在核蛋白体上的缩合。(一）氨基酸的活化转运氨基酸的活化过程及其活化后与相应tRNA的结合过程，都是由氨基酰tRNA合成酶来催化的，tRNA+氨基酸+ATP〖FY(KN〗氨基酰tRNA合成酶〖FY)〗氨基酰-tRNA+AMP+焦磷酸。以氨基酰tRNA形式存在的活化氨基酸，即可投入氨基酸缩合成肽的过程。氨基酰tRNA合成酶存在于胞液中，又能辨认携带该种氨基酸的特异tRNA分子。每种氨基酰tRNA合成酶都能从多种氨基酸中选出与其对应的一种，（二）核蛋白体循环tRNA所携带的氨基酸，核蛋白体循环”在核蛋白体上缩合成肽，以原核生物中蛋白质合成为例，将核蛋白体循环人为地分为启动、肽链延长和终止三个阶段进行介绍。