DNA解旋酶:解旋酶,D N A聚合酶,DNA连接酶分别作用于什么部位

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1.解旋酶,D N A聚合酶,DNA连接酶分别作用于什么部位

1、解旋酶一般只能打开很短一部分的DNA双螺旋,在具体PCR操作的时候无法控制其具体在什么时间。2、不能保证DNA解旋酶解开DNA的那段时间足够长以便让引物和模板结合,而且引物和模板结合后,解旋酶还能立刻移开以免阻碍DNA合成酶的前进。聚合酶链式反应为一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。标准的PCR过程分为三步:1、DNA变性:

2.DNA转录时需要解旋酶吗?

RNA聚合酶通常不能单独发挥转录作用,而需要与其他转录因子共同协作,有些辅助功能的转录因子就是解旋酶。以反式作用影响转录的因子可统称为转录因子。RNA聚合酶是一种反式作用于转录的蛋白因子。与RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ相应的转录因子分别称为TFⅠ、TFⅡ、TFⅢ。转录是以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以ATP、CTP、GTP、UTP四种核苷三磷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。扩展资料转录的过程:1、转录的启动DNA上存在着转录的起始信号,它是特殊的核苷酸序列,转录是由RNA聚合酶全酶结合于启动子而被启动的。2、转录的起始当聚合酶结合到启动子上后,在启动子附近将DNA局部解链。

3.DNA转录需要解旋酶吗?

在转录过程中,DNA模板被转录方向是从3′端向5′端;RNA链的合成方向是从5′端向3′端。RNA的合成一般分两步,第一步合成原始转录产物(过程包括转录的启动、延伸和终止);第二步转录产物的后加工,使无生物活性的原始转录产物转变成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始转录产物一般不需后加工就能直接作为翻译蛋白质的模板。RNA聚合酶正确识别DNA编码链上的启动子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸(NTP)构成的三元起始复合物,DNA模板上的启动区域常含有TATAATG顺序,复合物中的核苷三磷酸一般为GTP,因而原始转录产物的5′端通常为三磷酸鸟苷(pppG)或腺苷三磷酸(pppA)。真核DNA上的转录启动区域也有类似原核DNA的启动区结构,和在-30bp(即在酶和DNA结合点的上游30核苷酸处,bp为碱基对的简写)附近也含有TATA结构,转录的终止包括停止延伸及释放RNA聚合酶和合成的RNA。在原核生物基因或操纵子的末端通常有一段终止序列即终止子;RNA合成就在这里终止。原核细胞转录终止需要一种终止因子ρ(四个亚基构成的蛋白质)的帮助。真核生物DNA上也可能有转录终止的信号。已知真核DNA转录单元的3′端均含富有AT的序列〔如AATAA(A)或ATTAA(A)等〕,这些结构可能与转录终止或者与3′端添加多聚A顺序有关。成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA(脱氧核糖核酸)复制的结构过程,并首次观察到其与DNA间的相互作用。温安洛研究所教授李慧琳(音译)从酵母生物体内提纯出CMG解旋酶(这些酵母常用于包括人类在内的高等真核生物的研究),然后利用洛克菲勒大学低温电子显微镜拍摄出CMG解旋酶在DNA复制中的结构图像。CMG解旋酶能像拉链一样将DNA双螺旋打开,在DNA复制中扮演关键角色,而DNA复制是生命繁殖的基本过程。解旋酶中碳环优先于氮环与双链DNA作用,但这次对DNA双链解旋过程拍摄的图像显示,氮链比碳链更先与双链DNA作用。

4.PCR技术中为什么不用解旋酶

原因如下:1、解旋酶一般只能打开很短一部分的DNA双螺旋,在具体PCR操作的时候无法控制其具体在什么时间。2、不能保证DNA解旋酶解开DNA的那段时间足够长以便让引物和模板结合,而且引物和模板结合后,解旋酶还能立刻移开以免阻碍DNA合成酶的前进。聚合酶链式反应为一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。扩展资料:标准的PCR过程分为三步:1、DNA变性:(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。2、退火:(60℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3、延伸:(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸,合成与模板互补的DNA链。参考资料来源:百度百科-聚合酶链式反应

5.DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA解旋酶的区别和共同点及作用位置,作用方式

DNA聚合酶主要连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,起连接作用.在基因工程中起作用,同时DNA连接酶在DNA复制中也起作用,几种酶的比较限制性核酸内切酶(以下简称限制酶):限制酶主要存在于微生物(细菌、霉菌等)中。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶(“几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组DNA技术和基因诊断中重要的一类工具酶。从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列,DNA连接酶:主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,DNA聚合酶:主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上,而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。RNA聚合酶(又称RNA复制酶、RNA合成酶)的催化活性:RNA聚合酶以完整的双链DNA为模板,转录时DNA的双链结构部分解开,转录后DNA仍然保持双链的结构。真核生物RNA聚合酶:真核生物的转录机制要复杂得多,有三种细胞核内的RNA聚合酶:RNA聚合酶I转录rRNA,RNA聚合酶II转录mRNA,RNA聚合酶III转录tRNA和其它小分子RNA。

6.DNA聚合酶,DNA解旋酶,DNA水解酶,DNA连接酶的区别?

DNA聚合酶是在DNA复制时,将脱氧核苷酸分子一个个加到模板链上形成新的DNA分子时所用的酶;DNA解旋酶是在DNA复制时将DNA分子的双螺旋结构解开时所用的酶;

7.DNA聚合酶,解旋酶,RNA聚合酶各自的作用对象和作用时期(详细)

DNA聚合酶以脱氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、或dTTP,解旋酶以DNA双链的氢键为作用对象,作用时期为DNA或RNA复制时期。RNA聚合酶以四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)为作用对象,扩展资料1、DNA聚合酶特性聚合作用:按模板DNA上的指令,逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3'逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用;这种酶活性的主要功能是从3’→5’方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3’→5’外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸,3’→5’外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。5’→3’外切酶活性(切除修复作用):该活性是从5’→3’方向水解DNA延长链前方的DNA链(即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用),这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。2、DNA解旋酶(DNA helicase)通常为流体蛋白环,通过ATP水解产生的能量由解旋酶装载器装载到DNA单链上(单链穿过环中央),该极性就是它结合的单链的极性。它像DNA聚合酶一样具有延伸性。装载到单链DNA上之前,DNA解旋酶是没有活性的,只有解旋酶装载器将它装载到单链DNA上,DNA解旋酶的活性才被激活。运动到单链末端时,注意DNA解旋酶结合的是DNA单链而不是双链,至于它结合的单链,是由起始子蛋白作用到被称为复制器的DNA区段使该区段发生双链解旋才产生的。3、RNA聚合酶该酶需要四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作为RNA聚合酶的底物,DNA为模板。

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