目的基因:目的基因要怎样分离?

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1.目的基因要怎样分离?

作为目的基因,如那些特效药物相关的基因和降解毒物相关的基因等。但是那些表达产物有害的基因,也不是绝对不能作为目的基因,往往在特殊需要的情况下也作为目的基因进行使用,选用什么样的目的基因是基因工程设计必须优先考虑的问题,如何分离获得目的基因是基因工程操作的重要技术之一。目的基因主要来源于各种生物。特别是人和动植物染色体基因组中蕴藏着大量的基因,是获得目的基因的主要来源。虽然原核生物的染色体基因组比较简单,但也有几百、上千个基因,也是目的基因来源的候选者。质粒基因组、病毒(噬菌体)基因组、线粒体基因组和叶绿体基因组也有少量的基因,往往也可从中获得目的基因。待分离的目的基因可能是一个基因编码区,或者包含启动子和终止子的功能基因;或者由几个功能基因、几个操纵子聚集在一起的基因簇;也可能只是一个基因的编码序列。

2.获取目的基因的方法有哪些(详细)

获取目的基因的方法主要有两种:一是从供体细胞的DNA中直接分离基因,二是以目的基因转录的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,再在酶的作用下合成双链DNA,另一条途径是蛋白质的氨基酸序列,

3.目的基因有什么作用?

4.获取目的基因的常用方法是哪种?

1.从基因文库中获取目的基因:将含有某种生物的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库。 当需要某一片段时,根据目的基因的有关信息,如根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。 2.化学合成法。已知目的基因的核苷酸序列,可用DNA合成仪直接合成。 3.用PCR技术扩增技术提取。已知目的基因引物的序列,将整个DNA放入合成仪,因为只有当引物与模板结合后DNA热聚合酶才能行使聚合功能,所以只有引物中间的目的基因被大量扩增,即被提取出来。

5.人工合成目的基因的办法?

目前人工合成基因的方法主要有两条途径。一条途径是以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的信使RNA序列,推测出它的结构基因的核苷酸序列。

6.什么是PCR扩增目的基因?

PCR扩增技术已广泛地用于分离目的基因。如果知道目的基因的全序列或其两侧的序列,可以通过合成一对与模板DNA互补的引物,十分有效地扩增出含目的基因的DNA片段,采用常规PCR技术扩增分离目的基因比较方便,但必须知道待扩增目的基因DNA片段的核苷酸序列,或者至少要求DNA片段两端长约20bp的序列是已知的,这样才能设计PCR引物进行有效做PCR扩增反应。利用常规PCR反应,允许扩增的DNA片段长度一般在1kb以内。

7.人工合成目的基因是什么?

对于较短的基因(60~80bp),可以通过化学方法分别合成两条DNA链,让这两条链在适当条件下退火,为了获得大于300bp的DNA双链,可以采取短DNA片断法或短核苷酸片段法。前者合成一套将全长基因包括在内的、彼此有一定重叠的短DNA片段。
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